Sumários
Not Taught.
29 Março 2022, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data, esta turma não teve aula prática.
Aula 3
29 Março 2022, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Realização por parte dos alunos da colheita de embriões de galinha de 2 e 3 dias partir de ovos galados incubados. Observação dos embriões a lupa e determinação do estádio HH. Fixação dos embriões em fixador 4% PFA em PBS
Protocolo da aula:
OBSERVAÇÃO DE EMBRIÕES DE GALINHA (2-3 dias) E A SUA FIXAÇÃO PARA HIBRIDAÇÃO IN SITU
- Lava o material cirúrgico com álcool e deixa secar.
- Retira um ovo da incubadora, orienta-o com o lado ponteagudo para cima e fura a parte redonda (parte de baixo) com uma pinça grossa.
- Corta a casca na parte ponteagúda com uma tesoura grossa e retira “a tampa” do ovo. Abre o suficiente para ver a gema e o embrião.
- Se o embrião for visível, coloca o ovo num suporte, retira o embrião da gema e coloca-o numa caixa de Petri grande (diâmetro 10 cm) com “Phosphate Buffered Saline” (PBS). Se o embrião não for visível, coloca o conteúdo do ovo numa caixa de Petri grande e procura o embrião. Método para tirar o embrião da gema: corta a membrana da gema à volta do embrião e remove o embrião com uma colher de café.
- Observa o embrião na lupa. Remove a gema a volta do embrião e, utilizando uma pipeta de Pasteur de plástico com a ponta cortada, transfere-o para uma caixa de Petri com PBS limpo. Quando tiver completamente livre de gema, transfere o embrião para uma caixa de Petri com fundo preto.
- Observa o embrião à lupa e determina o estádio HH, utilizando a tabela de desenvolvimento de Hamburger e Hamilton. Consulta tanto as imagens de embriões como a descrição de cada estádio para determinar com rigor o estádio do embrião.
- Leva o embrião para a hotte e transfere para um tubo com fixador 4% PFA em PBS.
Aula 2
22 Março 2022, 13:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Fertilização o desenvolvimento precoce no ouriço-do-mar ao vivo.
Objectivo 1: Observação de oócitos e espermatozóides
Objectivo 2: Observação da fertilização.
Objectivo 3: Observação das modificações que ocorrem ao nível do núcleo e citoplasma até a primeira divisão mitotica. Observação da segunda clivagem. Opcional: obervação de gastrulas e larvas pluteus no dia seguinte.
Objectivo 4: Executar uma experiência que testa o efeito da concentração dos espermatozóides no (1) sucesso da fertilização e (2) a incidência de polispermia. Elaboração de um gráfico com os resultados obtidos.
Protocolo da aula:
Observação de oócitos:
· Colocar uma gota de oócitos em água do mar numa lâmina e observar no microscópio (obj. 10x - não usar a objectiva de 40x!!). Identificar oócitos maduros e imaturos.
· Adicionar uma gota muito pequena de tinta de China e misturar com um palito. Observar a geleia.
Observação de espermatozóides:
(só podem usar a objetiva de 40x COM LAMELA - a água do mar destrói objectivas!).
· Preparar sémen diluído em água do mar. Observar com a objetiva de 10x sem lamela e depois colocar uma lamela e observar com a objetiva de 40x
Fertilização:
· Preparar uma caixa de Petri com oócitos em água do mar. Colocar uma gota de oócitos numa lâmina, colocar no microscópio e focar com a objetiva de 10x.
· A docente adiciona esperma diluído à caixa de Petri (vai ser usado para observar as fases de clivagem) e coloca uma gota de esperma na lâmina.
· Juntar a gota de esperma com a gota de oócitos usando um palito. Observar a fertilização.
Clivagem:
· Retirar uma gota de embriões em clivagem da caixa de Petri e observar sem lamela com a objetiva de 10x. Observar a alteração ao nível do núcleo e a formação do fuso mitótico.Observar a 1ª divisão mitótica (±40-50* min após a fertilização), a 2ª divisão mitótica (10-15* min após a 1ª) e a 3ª divisão mitótica (10-15* min após a 2ª). *depende da temperatura da sala
Aula 2
22 Março 2022, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
Fertilização o desenvolvimento precoce no ouriço-do-mar ao vivo.
Objectivo 1: Observação de oócitos e espermatozóides
Objectivo 2: Observação da fertilização.
Objectivo 3: Observação das modificações que ocorrem ao nível do núcleo e citoplasma até a primeira divisão mitotica. Observação da segunda clivagem. Opcional: obervação de gastrulas e larvas pluteus no dia seguinte.
Objectivo 4: Executar uma experiência que testa o efeito da concentração dos espermatozóides no (1) sucesso da fertilização e (2) a incidência de polispermia. Elaboração de um gráfico com os resultados obtidos.
Protocolo da aula:
Observação de oócitos:
· Colocar uma gota de oócitos em água do mar numa lâmina e observar no microscópio (obj. 10x - não usar a objectiva de 40x!!). Identificar oócitos maduros e imaturos.
· Adicionar uma gota muito pequena de tinta de China e misturar com um palito. Observar a geleia.
Observação de espermatozóides:
(só podem usar a objetiva de 40x COM LAMELA - a água do mar destrói objectivas!).
· Preparar sémen diluído em água do mar. Observar com a objetiva de 10x sem lamela e depois colocar uma lamela e observar com a objetiva de 40x
Fertilização:
· Preparar uma caixa de Petri com oócitos em água do mar. Colocar uma gota de oócitos numa lâmina, colocar no microscópio e focar com a objetiva de 10x.
· A docente adiciona esperma diluído à caixa de Petri (vai ser usado para observar as fases de clivagem) e coloca uma gota de esperma na lâmina.
· Juntar a gota de esperma com a gota de oócitos usando um palito. Observar a fertilização.
Clivagem:
· Retirar uma gota de embriões em clivagem da caixa de Petri e observar sem lamela com a objetiva de 10x. Observar a alteração ao nível do núcleo e a formação do fuso mitótico.Observar a 1ª divisão mitótica (±40-50* min após a fertilização), a 2ª divisão mitótica (10-15* min após a 1ª) e a 3ª divisão mitótica (10-15* min após a 2ª). *depende da temperatura da sala
Not Taught.
22 Março 2022, 08:00 • Solveig Thorsteinsdottir
A BDA tem uma carga horária de aulas práticas de 2h por semana mas são lecionadas em aulas de 4h 15 em 15 dias. Sendo assim nesta data, esta turma não teve aula prática.